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    斑點(diǎn)濾膜結(jié)合法

    發(fā)布時(shí)間: 2022-03-14  點(diǎn)擊次數(shù): 1216次


    原理


    材料與儀器


    待測(cè)蛋白質(zhì)樣品
    10%三氯醋酸(TCA) 考馬斯亮藍(lán)凝膠染色液 考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液
    Whatman 3 MM 濾紙


    步驟



    1. 用鉛筆在 3 mm 濾紙上畫出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


    2. 在每一方格中心加入 3 ul 樣品;


    3. 將濾紙涼干,大約需要 15 min;


    4. 將濾紙浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重復(fù)使用);


    5. 用水快速漂洗濾紙;


    6. 將濾紙浸入考馬斯亮藍(lán)凝膠染液中 30 s(染液可重復(fù)使用);


    7. 用水快速漂洗濾紙;


    8. 在考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液中使濾紙脫色,脫色在幾分鐘之內(nèi)完成;


    9. 通過相應(yīng)顯藍(lán)色的方格,可判斷其含有一定量的蛋白質(zhì)存在。



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