一、人白血病懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品應用：

各種細胞類型中最高的轉(zhuǎn)染效率。

可用于多種真核細胞系的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染和共轉(zhuǎn)染；

可用于各種原代細胞的DNA轉(zhuǎn)染、siRNA轉(zhuǎn)染；

可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細胞、懸浮細胞，如:T細胞、NK細胞、人淋巴細胞、THP-1等；

可高效率轉(zhuǎn)染siRNA到任何哺乳動物細胞。

人白血病懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑

二、產(chǎn)品說明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲存條件

常溫運輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復凍融。

三、U937細胞高效率轉(zhuǎn)染條件分享

一、轉(zhuǎn)染材料準備

1. 轉(zhuǎn)染試劑用量：10ul

2. DNA/siRNA濃度：電訊

3. 細胞密度：1*106-1*105

4. 轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板：6孔板

5. 轉(zhuǎn)染試劑：zeta life ,Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑；貨號：AD600025

6. 轉(zhuǎn)染時間：15小時

7. 細胞培養(yǎng)胎牛血清：Z7181FBS-500胎牛血清

8. 細胞凍存液：L0100無血清細胞凍存液

注意：本細胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。

操作過程：

1.提前1天接種細胞：細胞匯合度在60-80%左右，再進行轉(zhuǎn)染。

2. 核酸復合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例關系直接混合，用移液器吹打、混勻，室溫靜止15分鐘。

3.在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物，并輕輕混勻；細胞培養(yǎng)基里面可以含有血清。

4.細胞換液：轉(zhuǎn)染24小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

5.分析結果：質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染48-72小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率，48-96小時檢測mRNA或蛋白表達。若進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選，則在轉(zhuǎn)染后24-48小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA轉(zhuǎn)染后9小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率，48-72小時檢測mRNA或蛋白表達。