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    轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA發(fā)表論文分享

    發(fā)布時間: 2022-04-11  點擊次數: 1679次

    zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNAIF11.556)論文分享

    zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享


    zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享編輯

     

    一、 轉染造血干細胞(HPCs)或造血祖細胞-共轉染兩種質粒DNA文章概述:

    檢測特異性蛋白Sp1對FcγRIIB的影響在造血干細胞(HPCs )中表達,FcγRIIB 啟動子區(qū)域為(-1500 ~ +1從轉錄起始位點),合成并亞克隆到pGL3載體, Sp1結合位點 5'-GGGGCGGGGC突變?yōu)?5'-AAGGCAAGGC,含有 Sp1過表達或含有模擬物。

    使用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉染試劑(#AD600025,Zeta Life, USA)對造血干細胞(HPCs )共轉染 1 μg 報告載體和 20 ng pSV-Renilla 表達載體(含、模擬物和 Sp1),轉染的細胞是孵育 48 小時后收細胞并檢測。

    文章作者:重慶大學附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤內科IF11.556

    標題:FcγRIIB potentiates differentiation of myeloid-derived suppressor cells to mediate tumor immunoescape


    二、轉染造血干細胞(HPCs)

    zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享

     

    zeta life轉染造血干細胞(HPCs)共轉染2種質粒DNA(IF11.556)論文分享 編輯

     

    FcγRIIB promoter luciferase reporter assay

    To measure the effect of Sp1 on FcγRIIBexpression in HPCs, the FcγRIIB promoter region

    (-1500 ~ +1 from the transcription starting site) wassynthesized by GenScript co., LTD (Nanjing, China)and subcloned into pGL3-basic vector (Promega,Madison, WI, USA), Sp1 binding site 5’-GGGGCGGGGC was mutated to 5’-AAGGCAAGGC.Lentivectors containing Sp1 overexpression or a lentivector containing mock were obtained from Genechem (Shanghai, China). The HPCs were transfected with 1 μg of reporter vector and 20 ng of pSV-Renilla expression vector (mock and Sp1) using Advanced DNA RNA Transfection Reagent (Cat No.AD600025, Zeta-life). Transfected cells were incubated for 48 h, Luciferase and Renilla activitie were measured using the dual-luciferase reporter system kit (Cat No. E1910, Promega). The transfection was performed according to the manufacturer' protocol.


    、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉染試劑,此技術成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產的主要關鍵技術之一。


    、文獻中所用轉染試劑產品信息

    產品名稱:Advanced  DNA RNA  轉染試劑

    貨號:AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

    規(guī)格:0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

     

    安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉染試劑,均經過反復充分驗證,轉染效果好且重復性佳,提供完整售后服務和技術支持。


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    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規(guī)模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質的產品和技術服務,努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。

     

     

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