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    AO染色法(丫啶橙染色法)檢測(cè)細(xì)胞凋亡

    發(fā)布時(shí)間: 2021-11-01  點(diǎn)擊次數(shù): 3201次
    材料與儀器

    【試劑】pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS緩沖液, AO染料:將AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,終濃度為6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。 【儀器】熒光顯微鏡

    實(shí)驗(yàn)步驟

    制備活細(xì)胞懸液106 /ml; 取95μl細(xì)胞懸液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min; 加入5ml PBS,1500r/min離心5min,棄上清,重復(fù)洗滌2次; 重懸細(xì)胞,吸一滴滴于玻片上并用蓋玻片封片;

    要點(diǎn)

    在熒光顯微鏡下,選用515nm激發(fā)光鏡檢:AO染色細(xì)胞DNA呈黃色或黃綠色。當(dāng)細(xì)胞凋亡時(shí),染色呈致密濃染的黃綠色熒光或見黃綠色碎片。


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